Alterações genéticas em casais com antecedentes de aborto recorrente no primeiro trimestre da gestação / Genetic alterations in couples with a history of recurrent miscarriage in the first trimester of pregnancy

O abortamento é considerado um problema multifatorial, cujas principais causas envolvidas na sua etiologia são os fatores ambientais (como exposição a substâncias tóxicas), genéticos, anatômicos, endócrinos, imunológicos, trombofílicos e doenças infecciosas (como toxoplasmose, rubéola). No entanto, os fatores genéticos são atribuídos principalmente aos abortamentos de primeiro trimestre da gestação. As alterações cromossômicas, o polimorfismo C677T, no gene da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR677C>T); o polimorfismo G1691A, no gene do Fator V de Leiden (FVL1691G>A), e o polimorfismo G20210A, no gene da protrombina (PRT20210G>A), têm sido associados a problemas obstétricos, incluindo aborto recorrente. O objetivo deste trabalho foi investigar associação entre as mutações relacionadas à trombofilia, presença de alterações cromossômican e a ocorrência de aborto espontâneo recorrente e avaliar possíveis interações entre as referidas mutações e as alterações cromossômicas. A casuística foi composta por 151 mulheres com história de aborto recorrente, 94 parceiros e 100 controles (mulheres sem histórico de aborto). A investigação das mutações foi realizada pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase- Polimorfismo de Tamanho de Fragmento de Restrição. As alterações cromossômicas foram investigadas pela cariotipagem com banda–G. A frequência das alterações cromossômicas foi de 7,3% nas mulheres com abortamento recorrente e 1% nos controles (p=0,022), e de 2,1% nos parceiros. No entanto, a frequência dos alelos MTHR677C>T (23% versus 22,5%), FVL1691G>A (1,5% versus 1% ) e PRT20210G>A (1,45% versus 0%) foi similar entre casos e controles, respectivamente. No grupo investigado, foi observada associação entre aborto recorrente e alterações cromossômicas, mas não foi encontrada associação com os polimorfismos gênicos investigados.

Abortion is considered a multifactorial problem, the most important causes involved in its etiology are, environmental factors ( as exposure to toxic chemicals), genetic, anatomic, endocrine, immunological, thrombophilic and infectious diseases (such as toxoplasmosis, rubella). However, genetic factors are mainly attributed to abortions of the first trimester of pregnancy. Chromosomal abnormalities, MTHFR 677C>T, factor V Leiden 1691G>A and prothrombin 20210G>A mutations have been associated with obstetric problems, including recurrent miscarriage. The objective of this research was to investigate associations between mutations in three genes commonly associated to thrombophilic events, chromosomal abnormalities and the occurrence of recurrent miscarriage. As well evaluate possible interactions between these mutations and chromosomal abnormalities. The sample was comprised of 151 women with history of recurrent miscarriages, 94 partners and 100 control (women with no history of abortion). The investigation of the mutations was performed by Polymerase Chain Reaction (PCR)/ Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP). Chromosomal aberrations were investigated by karyotyping with G-banda. The frequency of chromosomal abnormalities was 7.3% in women with recurrent miscarriage and 1% in controls (p = 0.022), and 2.1% in the partners. However, the frequency of allele MTHR677C> T (23% versus 22.5%), FVL1691G> A (1.5% vs. 1%) and PRT20210G> A (1.45% vs. 0%) was similar for cases and controls, respectively. In the investigated group was found association between recurrent miscarriage and chromosomal abnormalities, but no association was found with the genetic polymorphisms investigated.

Los cromosomas mitóticos y meióticos del pez tropical Petenia splendida (Cichlidae)

The mitotic and meiotic chromosomes of the tropical fish Petenia splendida (Cichlidae). The karyotype of bay snook, Petenia splendida, is described based on mitotic and meiotic stages of sixty larvae and twelve juveniles from Tabasco, Mexico. Standard cytological procedures with minor modifications were followed to obtain mitotic and meiotic chromosome spreads. One hundred chromosome slides were analyzed and 290 chromosome spreads were counted. High-quality spreads in mitosis and meiosis were used for karyotype analysis. Mitotic chromosome spreads showed 76.7 % of such cells with 2n=48 chromosomes, while meiotic spreads revealed 55.2 % with 24 chromosomes in haploid stage. Photographic documentation of eight highquality pictures showed that the karyotype consists of three pairs of bi-armed metacentric-submetacentric chromosomes (msm) and 21 pairs with uni-armed subtelocentric-acrocentric chromosomes (sta), with a fundamental number (FN) of 54 arms. Karyotype chromosomes were verified by analysis of haploid and diploid metaphases at meiotic stage I. Abundant chromosome spreads were observed more frequently on slides from larvae. No evidence of heteromorphism to discriminate sexual chromosomes was detected. There were "dot-like" chromatic bodies in both sexes and they were classified as "B" chromosomes. The karyotype of P. splendida is type "A", i.e. primitive in the Cichlid family, similar to other species of Cichlasoma. The occurrence of supernumerary chromosomes is still unknown: studies on the effects of pollution and hybridization might be important to understand that phenomenon. Rev. Biol. Trop. 56 (2): 895-907. Epub 2008 June 30.

Para describir los cromosomas del cariotipo en mitosis y meiosis de la mojarra tenguayaca P. splendida, se procesaron 60 larvas y doce jóvenes (seis hembras y seis machos) procedentes de Tabasco, México. Se emplearon los procedimientos citológicos clásicos para peces pequeños y grandes, con algunas modificaciones que permitieron obtener campos cromosómicos en meiosis y mitosis. Analizamos al microscopio 100 laminillas, contando 290 dispersiones cromosómicas. En mitosis, 76.7 % de los conteos dieron número modal diploide de 2N=48 cromosomas, mientras en meiosis el 55.2 % mostró 24 cromosomas en condición haploide. Se analizaron ocho de las mejores fotografías para establecer el cariotipo y se identificaron tres pares de cromosomas birrámeos metacéntricos-submetacéntricos (msm) y 21 pares de cromosomas monorrámeos subtelocéntricos-acrocéntricos (sta) con número fundamental (N.F) de 54 brazos. Se corroboró el cariotipo mediante el análisis de campos cromosómicos en estadio haploide y diploide de la meiosis I. Las dispersiones cromosómicas tuvieron un número mayor en larvas que en jóvenes. No hubo diferencias heteromórficas para distinguir cromosomas sexuales. Sin embargo, se observó la presencia de cuerpos cromáticos en forma de puntos, como una característica propia de los microcromosomas "B". Para esta familia, el cariotipo de P. splendida es primitivo o tipo "A"; y es estrechamente parecido al del género Cichlasoma. El origen de los cromosomas supernumerarios es un fenómeno aun desconocido en los cíclidos por lo que faltan estudios relacionados con el daño causado por la contaminación y la hibridación.

Síndromes genéticas e cardiopatia / Genetic disorders and cardiac anomalies

A genética como ciência ue trata dos mecanismos que controlam a constância e as mudanças que se operam nos seres vivos, nasceu com a descoberta dos princípios mendelianos, em 1865. Contudo, o reconhecimento desses preceitos só passou a ser valorizado depois de cerca de 35 anos. Desde então, essa área tem se desenvolvido de forma espantosa.Novos conhecimentos não param de surgir, como o reconhecimento de novos modelos de herança que não os tradicionais (como por exemplo:dissomia uniparental e herança mitocondrial; polimorfismos, microdeleções e genes contíguos, região telométrica e seu papel no retardo mental; presença de diferentes fenótipos cujo substrato pode ser explicado pelo mesmo tipo de mutação e vice-versa; identificação de alguns genes importantes das doenças poligênicas), sem contar com o ápice de todo esse avanço biológico, representado pelos resultados do Projeto Genoma Humano.Muitos são os campos de interesse da genética humana; na prática da genética clínica, é de importância fundamental o reconhecimento ao menos de alguns distúrbios genéticos mais frequentes, para que seu diagnóstico, prevenção, tratamento e devido aconselhamento sejam procedidos de forma adequada e as implicações desse manejo apropriado possam se fazer sentir na área da saúde pública.Por essa razão, o enfoque de algumas doenças genéticas mais comumente observadas na prática clínica e que possam, porventura, assolar os cardiologistas, justamente pela frequencia elevada com que determinados defeitos cardíacos em seus portadores estejam presentes, foi motivo deste trabalho, com o intuito de que seu reconhecimento seja o mais precoce possível

Chromosomal analysis of "failed-fertilized" human oocytes resulting from in-vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection.

To evaluate the incidence of chromosomal abnormalities in "failed-fertilized" oocytes derived from in-vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) procedure, a cytogenetic analysis was performed on 164 IVF and 64 ICSI oocytes. One hundred and eleven (67.7%) of the IVF and 56 (87.5%) of the ICSI oocytes were successfully karyotyped. Of 111 IVF oocytes, 73 (65.8%) exhibited normal haploid and 38 (34.2%) were abnormal. The abnormalities included 25 aneuploid (22.5%) (7 hyperhaploid and 18 hypohaploid), 11 diploid (9.9%) and 2 structural anomalies (1.8%). Of 56 ICSI oocytes, 52 (92.8%) were normal haploid and only 4 (7.2%) were aneuploid, with 2 hyperhaploid and 2 hypohaploid. The sperm nuclei were observed in 43 IVF oocytes (38.7%), composed of 38 (34.2%) premature chromosome condensation (PCC) and 5 (4.5%) decondensed sperm heads. Evidence of successful sperm delivery was found in all 56 ICSI oocytes; 25.0 per cent (14/56) showed PCC, 17.9 per cent (10/56) showed decondensed sperm heads, and 57.1 per cent (32/56) showed intact sperm heads. This study suggested that about one-third of unfertilized oocytes exhibited chromosomal abnormalities. The difference of aneuploidy between IVF and ICSI oocytes needs further studies analysing a larger number of oocytes.

Patterns of replication in the neo-sex chromosomes of Drosophila nasuta albomicans.

Drosophila nasuta albomicans (with 2n = 6), contains a pair of metacentric neo-sex chromosomes. Phylogenetically these are products of centric fusion between ancestral sex (X, Y) chromosomes and an autosome (chromosome 3). The polytene chromosome complement of males with a neo-X- and neo-Y-chromosomes has revealed asynchrony in replication between the two arms of the neo-sex chromosomes. The arm which represents the ancestral X-chromosome is faster replicating than the arm which represents ancestral autosome. The latter arm of the neo-sex chromosome is synchronous with other autosomes of the complement. We conclude that one arm of the neo-X/Y is still mimicking the features of an autosome while the other arm has the features of a classical X/Y-chromosome. This X-autosome translocation differs from the other evolutionary X-autosome translocations known in certain species of Drosophila.

Adolescente con Tetrasomía del X e inversión del cromosoma 9: reporte de un caso / Adolescent with X Tretrasomies inversion of the chromosome 9: report a case

Las terasomías del cromosoma X son complementos cromosómicos raros no asociados a un cuadro clínico específico pero la mayoría de los pacientes con esta polisomía del X presentan retardo en el aprendizaje, inmadurez emocional y disfunción gonadal. En el presente trabajo, se describen los hallazgos clínicos y citogenéticos en una paciente con amenorrea primaria, retardo psicomotor, inmadurez emocional y cariotipo 48, XXXX, inv (9). Aunque es difícil correlacionar los cromosomas X supernumerarios en esta paciente con la inversión del cromosoma 9 heredada del padre, el presente caso parece ser, hasta donde sabemos, la primera tetrasomía del X asociada a una inversión pericentromérica del cromosoma 9. Las tetrasomías del X podrían originarse por dos errores no-disyuncionales sucesivos ocurridos posiblemente en la gametogénesis materna

El surgimiento de la biología molecular / Appearance of molecular biology

La biología molecular constituye hoy en día la punta de lanza dentro de las perspectivas diagnósticas y terapéuticas para el próximo milenio. Ni el médico clínico ni el investigador biomédico pueden permanecer ajenos a dichos acontecimientos, es por ello que hemos considerado importante revisar los aspectos sobresalientes y prácticos de esta rama de la ciencia, a través de una serie de artículos que hagan más familiar su comprensión, fundamentalmente para aquellos quienes no tienen acceso a la información especializada

El enclaustramiento cromósomico, la frecuencia de mitosis y su relación con la proporción Carnoy/KCL / The enclosed chromosome, the frecuency of mitoses and their relationship with the Carnoy/KCL ratio

Se investigó el efecto de diferentes proporciones de Carnoy/KCI sobre la frecuencia de mitosis enclaustradas por los residuos de citoplasma y la relación de éstas con el número total de mitosis. Se demostró que la disminución de la proporción (de 1 a 0.5, 0.4 y 0.3) se asoció con una disminución de la frecuencia de mitosis enclaustradas y un aumento en el número total de mitosis. El resultado de esta divergencia, que denominamos Mitosis Efectiva (ME), con la proporción de 1 fue de 0.32 + - 0.24 por ciento (X + - DE) y con proporciones menores de 1 fue de 3.44 + - 2.25 por ciento (p<0.01). Este aumento se observó exclusivamente cuando el KCI se agregó a 37§C; la Microdosis (MD) de Carnoy 1 22§C se añadió al inicio de la incubación con KCI a 37§C y se incluyó un periodo de reposo de 10 minutos a 22§C entre las dos primeras fijaciones con Carnoy a 22§C. Se suprimió el beneficio de la disminución de la proporción sobre el enclaustramiento y la frecuencia de mitosis, cuando se omitió la MD o el reposo, la MD se agregó al final de la incubación con KCI o a 4§C y el KCI o el Carnoy se añadieron a 22§C o 4§C respectivamente.

Efecto de la "microdosis" de Carnoy y de la proporcion KCI/Carnoy sobre el indice mitótico / Effects of Carnoy priming and the KCI/Carnoy ratio on the mititic index

Se estudiaron, en linfocitos de sangre periférica, los cambios en el Indice Mitótico (IM) producidos por la omisión o la adición de la "microdisis" (MD) de Carnoy (50ul), al inicio o al final de la incubación con KCI 75 mM. El efecto de diferentes proporciones y temperaturas de KGI y Carnoy también fue investigado. La prespuesta óptima, evidenciada por un Im de 9.8 +- 2.4 por ciento, se obtuvo del grupo en el que la MD, a 22oC, se agergó al inicio de la incubación con KGI a 37oC y la proporción KGI/Carnoy fue mayor de 2. El análisis conjunto de todos los resultados demostró que la omisión de la MD; que la MD añadida al final de la incubación; que la omisión del reposo entre las dos primeras fijaciones de Carnoy o éste adicionado a 4oC o el KGI a 22oC, produjeron IM bajos con valores comprendidos entre 0.6 +- 0.1 por ciento y 1.2 +- 0.6 por ciento (p <0.001 vs 9.8+- 2.4 por ciento).

DNA sequence amplification in sciarid flies: results and perspectives

The discovery of Dna sequence amplification in sciarid flies and investigations into its control and biological significance are reviewed. Results thus far show that amplification of specific salivary gland polytene chromosome bands is a general phenomenon in sciarids. It brought about as part of a final endoreplication cycle by the rising titer of ecdysterone that occurs as the Larvae approach the prepupal period. Amplification and transcription of these bands is a late, multistep effect of this hormone.The Dna puffs which form in amplified region produce mRNAs which are translated into polypeptides that appear to be involved in coccon formation. Application of molecular cloning techniques to the study of Dna amplification has allowed precise quantitation of amplification for several Dna puffs and is yielding maps of their transcription units.These techniques will ultimately help to define the origins of Dna puff replication and contribute to an understanding of the mechanism and control of the amplification phenomenon in sciaridae. Projections for future experimental approaches are presented